使用BTX电融合缓冲液应注意:
1、保持无菌环境。建议使用标准的无菌技术,以避免在使用过程中受到污染。
2、反复洗涤。BTXpress Cytofusion Medium C是一种低电导率培养基,专为电融合而设计。痕量的高电导率溶液如PBS或组织培养生长培养基可破坏融合过程。因此,在融合过程之前用BTXpress Cytofusion Medium C*清洗细胞是很重要的。
3、清洁电融合室。为避免其他离子污染源,每次使用后清洁电熔室,并用无菌去离子水*冲洗。
4、室温电融合。为了大限度地提高细胞融合效率,请在室温下使用BTXpress Cytofusion Medium C. 终洗涤之前的细胞洗涤可以在4℃下进行。
5、较大限度地减少缓冲区的时间。虽然Cytofusion Medium C无毒,但它不含有*支持细胞活力的营养素。为了获得宜结果,大限度地减少细胞悬浮在BTXpress Cytofusion培养基C中的时间。不建议细胞在终清洗后超过1小时保留在BTXpress Cytofusion Medium C中。
6、5:1直接稀释。电融合后,BTXpress Cytofusion培养基C中的细胞可以在细胞培养基中稀释而不洗涤细胞。将五份*培养基稀释至一份BTXpress Cytofusion Medium C的小稀释度。或者,可以在生长培养基中洗涤细胞以在培养之前*除去BTXpress Cytofusion培养基C。